ヒアルロン酸測定キットの特徴

１．測定原理

ヒアルロン酸固層化プレートに、ヒアルロン酸を含む試料及びビオチン標識ヒアルロン酸結合タンパク（Biotin-HABP）を添加し、固層化ヒアルロン酸に結合したBiotin-HABPをHRP-Avidin及び発色基質により検出する競合法です。

２．測定範囲

濃度3.13～200 ng/mLのヒアルロン酸を測定します。

３．各種分子量のHAの反応性

ヒアルロン酸結合タンパクを用いたサンドイッチ法と異なり、ヒアルロン酸の分子量による影響を受けにくいことが知られています ^1-3)。平均分子量7.4～2367 kDaのヒアルロン酸に対し、同等の反応性を示します。2.8 kDa（14糖）以下のHAオリゴ糖では反応性が低下していき、1.6 kDa（8糖）のHAには反応しません。

４．サンドイッチ法との比較

他社サンドイッチ法による測定キットを使用した場合、ヒアルロン酸の分子量により反応性が異なり、7.4 kDa以下の分子量ではほとんど反応しませんでした。

分子量の異なるHAを測定した結果

サンドイッチ法では、測定するHAの分子量による影響を大きく受け、低分子量では実際の濃度よりも低く、高分子量で実際の濃度より高い測定結果となります。

競合法（ヒアルロン酸測定キット）

分子量(kDa)	理論値(ng/mL)	実測値(ng/mL)	理論値に対する％
251	12.5	12.3	98
63	12.5	12.0	96
7.4	12.5	11.3	90

サンドイッチ法（A社製キット）

分子量(kDa)	理論値(ng/mL)	実測値(ng/mL)	理論値に対する％
251	10.0	14.1	141
63	10.0	7.6	76
7.4	10.0	6	6

５．特異性

ヒアルロン酸を特異的に認識し、他のグリコサミノグリカンとはほとんど交差反応しません。高濃度のCS-B：デルマタン硫酸には弱い反応性を示します。（CS：コンドロイチン硫酸、HS：ヘパラン硫酸、Hep：ヘパリン、KS：ケラタン硫酸、KPS：ケラタンポリ硫酸）

キットの構成

引用文献

1. Haserodt S et al., A comparison of the sensitivity, specificity, and molecular weight accuracy of three different commercially available Hyaluronan ELISA-like assays. Glycobiology. 21(2):175-183. 2011.
2. Maeda H et al., A competitive enzyme-linked immunosorbent assay-like method for the measurement of urinary hyaluronan. Biosci Biotechnol Biochem, 63(5):892-895, 1999.
3. Yuan H et al., Molecular mass dependence of hyaluronan detection by sandwich ELISA-like assay and membrane blotting using biotinylated hyaluronan binding protein. Glycobiology. 23(11):1270-1280. 2013.

製品ラインアップ

ヒアルロン酸受託測定サービス

PGリサーチ社では本キットを使用したヒアルロン酸受託測定サービスをご提供しております。

• 測定検体：ヒト、動物の血清、血漿、培養上清
  1. ヒトに対する病原性レベルが3以上の微生物等、あるいはHIV、HBV、HCVに感染している、あるいは感染している疑いのある患者 由来の検体はお受けできません。
  2. 組織消化、抽出操作および予備検討等が必要な場合は別途お見積りとなります。
  3. 測定後の残余検体はご返却しません。
  4. 検体には、通しの番号を付けていただきます。
• 測定法：ヒアルロン酸測定キットを用いた方法（二重測定）
• 製品番号：CR-HAQ-X（X：検体数）
  （例：10検体の場合はCR-HAQ-10）
• 価格：基本料（キット代込）¥93,000、測定料 ¥3,000/検体
• 必要検体量：0.5 mL（残余検体は返却いたしません、予めご了承ください）
• 納期：検体受領後3週間
• 納品物：試験報告書
  別紙の受託測定依頼書にご記入の上、当社企画開発課までご依頼ください。
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関連情報

• 蛍光標識ヒアルロン酸ナトリウム