腸内細菌およびそれらの毒素の腸管から血中へのトランスロケーションは、自己免疫疾患の病因として重要な寄与因子と考えられています。実際、ストレスや手術などで腸管の粘膜透過性が増大し、結果として血中に腸管粘膜からの細菌の移動が増加することが研究では示されています。

Chondrexではクローン病、潰瘍性大腸炎、慢性関節リウマチおよび慢性疲労症候群など、病原性腸内細菌と自己免疫疾患との関連を調べるための新しい腸管バリア機能の研究ツールを提供しております。

病原性環境因子の自己免疫疾患への関与

腸管透過性評価　D-キシロース測定キット　FITC標識デキストラン

消化管上皮細胞を介する物質の吸収/透過経路は細胞間隙短経路（Paracellular）及び経細胞路（Transcellular）があり、物質によりその透過は異なります。

高分子の蛍光標識したデキストラン（FITC-Dextran）は細胞間隙短経路により吸収/透過されます。上皮細胞が障害を受けている場合には細胞間の結合がゆるくなっているので、デキストランの吸収/透過が増加し、その障害が大きいほど高分子量のデキストランが吸収/透過されます。したがって実験の目的及びプロトコールにより、異なる分子量のデキストランを使用することで、細胞間隙短経路の評価ができると考えられています。

一方、低分子の単糖であるD-キシロース（D-Xylose）は細胞上のトランスポーターを通じて、経細胞路で吸収/透過されます。障害を受けた細胞ではトランスポータ機能が低下しているので、低い吸収/透過率を示します。

これらのツールを用いてin vivo及びin vitroの実験において、消化管のみならず血液脳関門（BBB）などにおける吸収/透過機能の評価が可能です。

消化管上皮細胞を介する物質の吸収/透過経路

DSS（Dextran Sulfate Sodium）誘導大腸炎モデル（Inflammatory Bowel Disease/IBD）

炎症性腸疾患（Inflammatory Bowel Disease/IBD）は多因子性の疾患であり、潰瘍性大腸炎（Ulcerative Colitis/UC）およびクローン病（Crohn's Disease/CD）の2つに分類することができます。DSSの濃度または投与期間を変えることでマウスやラットに容易に急性、慢性または再発性大腸炎を誘導することができます。マウスDSS誘導大腸炎はIBDの研究で頻繁に使用される疾患モデルです。ChondrexはDSS誘導大腸炎を評価するためのツールを提供しております。

FITC標識デキストランによる腸管透過性評価プロトコール
1. Fast mice 4 hours before oral feeding and for the duration of the experiment
2. Feed 40 kDA FITC-Dextran (6.25 mg/0.25 ml/mouse) by oral gavage
3. (3 hours later) Collect plasma
4. Dilute plasma 1:2 (or more) with PBS
5. Transfer 50-100 microliters of supernatant to a 96-well plate
6. Read fluorescence intensity at Ex: 490 nm and Em: 530 nm

LPS（Lipopolysaccharide）誘導敗血症モデル

エンドトキシンとして知られるリポポリサッカライドはグラム陰性細菌の外膜の主要な構成成分で、細菌性敗血症、炎症性腸疾患、肺疾患、歯周病および喘息のような炎症性疾患において病理学的に重要な役割を果たしています。敗血症モデルとしてはToxemia、Nonsurgical、Live bacteria、Surgical、Implantation、Cecal ligation and punctureなどがありますが、LPSにより誘発されるToxemia models（エンドトキシン血症モデル）は広く用いられています。

ChondrexのLPS溶液はBalb/cマウスにおいて用量500 μgが約50%の致死量です。エンドトキシン血症誘導のために、IP注射で250 μg（0.5 ml）/マウスを使うことができます（投与量は動物のベンダー、系統、飼育条件、週齢などに依存するので、使用する際には最適化が必要です）。またビオチン化LPSはフローサイトメトリー、酵素免疫測定法、ウエスタンブロット、蛍光顕微鏡などの用途においてLPSの機能を解析するために使用することができます。

ヘモグロビン測定キット

貧血は敗血症および自己免疫性疾患などの多くの炎症性疾患で認められる合併症です。マウス疾患モデルにおいても大腸炎、敗血症及び自己免疫性溶血性貧血などで確認されています。Chondrexではマウス疾患モデルで貧血の評価に使用できるヘモグロビン測定キットを提供しております

抗バクテリア毒素抗体測定キット

腸内細菌および毒素のトランスロケーションは物理的/心理的ストレス、薬物、手術などにより増加することが知られており、実際にこれらの成分および抗体が関節リウマチ等自己免疫疾患患者の滑液および血清中に検出されます。Chondrexでは一般的な腸内細菌成分および口内細菌成分に対する宿主の免疫応答の研究に用いるマウスおよびヒト抗バクテリア毒素抗体測定キットを提供します。

マウス抗体測定キット

ヒト抗体測定キット

LPS（E.coli O111:B4株由来）測定キット

抗E.coli（O111:B4株）、抗LPS（E.coli O111:B4株由来）抗体

Chondrexでは腸内環境およびその毒素に関する研究に用いる抗バクテリア抗体測定キットとともにマウス抗バクテリアモノクローナル抗体を提供します。

各抗体の反応性については下記をご参照ください。

※菌体およびLPSのどちらにも反応性を示します。
#菌体にのみ反応性を示します。

抗Staphylococcal enterotoxin A & B抗体測定キット

Chondrexでは黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）などによって産生されるStaphylococcal enterotoxins（SEs）の解析ツールを提供しております。SEsは臨床的知見や様々な動物モデルを用いた研究により、アトピー性皮膚炎、食物アレルギー、大腸炎、関節炎、全身性エリテマトーデスなどの様々な自己免疫疾患の病因となっていることが示唆されています。SEsは樹状細胞上のMHC II分子に結合し、T細胞や他の炎症性細胞のポリクローナルな活性化を刺激する「スーパー抗原」として知られている強力な免疫刺激物質です。さらにSEsは非常に安定しているため、加熱滅菌や消化プロテアーゼにさらされた後でも病理学的活性を維持します。SEsの中で、ブドウ球菌エンテロトキシンA（SEA）およびエンテロトキシンB（SEB）は腸炎を引き起こすことが確認されている毒素です。

Staphylococcal enterotoxin A & B測定キット

抗Staphylococcal enterotoxin A & B抗体